пїњ

¬ќ«ћќ∆Ќќ—“№  ќ––≈ ÷»» —“–” “”–Ќџ’ »«ћ≈Ќ≈Ќ»… ¬ ћ»ќ ј–ƒ≈ ѕ–» –≈ѕ≈–‘”«»ќЌЌќћ ѕќ¬–≈∆ƒ≈Ќ»» — ѕќћќў№ё 3-ќ —»ѕ»–»ƒ»Ќј —” ÷»Ќј“ј » 3-ќ —»ѕ»–»ƒ»Ќј јƒ»ѕ»Ќј“ј

”ƒ  615:611.127
¬ќ«ћќ∆Ќќ—“№  ќ––≈ ÷»» —“–” “”–Ќџ’ »«ћ≈Ќ≈Ќ»… ¬ ћ»ќ ј–ƒ≈ ѕ–» –≈ѕ≈–‘”«»ќЌЌќћ ѕќ¬–≈∆ƒ≈Ќ»» — ѕќћќў№ё 3-ќ —»ѕ»–»ƒ»Ќј —” ÷»Ќј“ј » 3-ќ —»ѕ»–»ƒ»Ќј јƒ»ѕ»Ќј“ј
1«амотаева ћ.Ќ., 1»нчина ¬.»., 1 ƒроздов ».ј., 1 узьмичев Ќ.ƒ., 2 узнецов ё.¬.
'ћордовский государственный университет им. Ќ.ѕ. ќгарева, —аранск, e-mail: zamy03@mail.ru;
2»нститут биохимической физики им. Ќ.ћ. Ёмануэл€ –јЌ, ћосква, e-mail: drk200'@mail.ru
Ќа модели окклюзии-реперфузии коронарной артерии у крыс исследовано вли€ние цитопротекторов ан-тиоксидантного типа действи€ из класса производных 3-оксипиридина на морфологические изменени€ в миокарде, св€занные с реперфузионным синдромом. ƒоказано, что 3-оксипиридина адипинат в дозе 80 мг/кг и 3-оксипиридина сукцинат в дозе 50 мг/кг снижают выраженность воспалительной реакции в зоне репер-фузии, что выражаетс€ в уменьшении лейкоцитарной инфильтрации миокарда, и достоверно уменьшают объем ишемизированного участка сердечной мышцы. Ѕолее выраженна€ кардиопротекторна€ активность при экспериментальном реперфузионном синдроме отмечаетс€ у 3-оксипиридина сукцината, что, веро€тно, св€зано с антигипоксантным действием сукцината. “аким образом, проведенные исследовани€ показали целесообразность применени€ производных 3-оксипиридина дл€ коррекции реперфузионного повреждени€ миокарда.
 лючевые слова: окклюзи€, реперфузионный синдром, инфаркт миокарда, 3-оксипиридин, антиоксиданты
THE POSSIBILITY OF CORRECTING OF THE STRUCTURAL CHANGES
IN MYOCARDIUM CAUSED BY REPERFUSION DAMAGES WITH THE HELP OF SUCCINAT 3-OXIPIRIDINE AND ADIPINAT 3-OXIPIRIDINE
1Zamotaeva M.N., 1Inchina V.I., 1Drozdov I.A., 1Kuzmichev N.D., 2Kuznetsov Y.V.
'Mordovian N.P.Ogariov State University, Saransk, e-mail: zamy03@mail.ru;
2Biochemical Physics Emmanuel N.M. Institute Russian Academy of Sciences, Moscow, e-mail: drk200'@mail.ru
On the model of occlusion-reperfusion of coronary artery in rats it is investigated the influence of cytoprotectors antioxidant action type from class derivatives of 3-oxipiridine on the morphological myocardium changes, caused by reperfusion syndrome. It is found, that adipinat 3-oxipiridine in a doze of 80mg/kg and succinat 3-oxipiridine in a doze of 50mg/kg increase the severity of inflammatory response in the area of reperfusion, that is expressed in increase leukocyte infiltration of myocardium and increase volume of the area of ischemia heart muscle. More pronounced cardioprotective activity in experimental reperfusion syndrome is observed in succinat 3-oxipiridine, this is associated with antihypoxic effect of succinat. Thus, the experimental study shows that it is purposeful to use derivatives of 3-oxipiridine for the correction of reperfusion myocardium damages.
Keywords: occlusion, reperfusion syndrome, myocardial infarction, 3-oxipiridine, antioxidants
¬ основе современных принципов лечени€ острого коронарного синдрома (ќ —) с подъемом сегмента 8“ лежит реканали-заци€ остро обтурированной коронарной артерии различными пут€ми (тромболи-зис, коронароангиопластика). Ёффективной реканализации всегда сопутствует реперфузионный синдром, часто про€вл€ющийс€ т€желой систолической дисфункцией левого желудочка [7], по€влением фатальных аритмий, распространением зоны инфаркта миокарда и неблагопри€тным прогнозом [10]. ¬ основе данного синдрома лежит гибель определЄнной части клеток в процессе восстановлени€ перфузии данной области левого желудочка. ѕроисходит это в результате сложной цепочки патологических процессов, следствием которых €вл€етс€ вхождение ионов —а++ и продуктов анаэробного гликолиза в ише-
мизированные клетки в св€зи с недостатком энергетических субстратов [3]. Ётому процессу способствует также продукци€ свободных кислородных радикалов, активаци€ нейтрофилов, отек эндотели€ и ми-оцитов, потер€ антиоксидантных энзимов и апоптоз кардиомиоцитов [11]. ¬ данной св€зи целесообразным представл€етс€ исследование эффективности кардиопротек-торов антиоксидантного типа действи€ при реперфузионном синдроме.
¬ наших исследовани€х ранее была доказана кардиопротекторна€ активность 3-оксипиридина сукцината и 3-оксипири-дина адипината при экспериментальной острой и хронической сердечной недостаточности у крыс [5, 6]. ѕоэтому перспективным представл€етс€ изучение эффективности этих соединений при реперфузионном повреждении миокарда.
1104
MEDICAL SCIENCES
÷елью нашей работы €вилось изучение вли€ни€ 3-оксипиридина адипината и 3-ок-сипиридина сукцината на морфологические изменени€, возникающие при реперфузион-ном повреждении миокарда в эксперименте.
ћатериалы и методы исследовани€
Ёксперименты проводились на 24 нелинейных белых крысах, содержащихс€ в стандартных услови€х вивари€. ѕредварительно наркотизированным уретаном (800 мг/кг внутрибрюшинно) животным проводилась трахеостоми€ и протезирование самосто€тельного дыхани€ аппаратом искусственной вентил€ции легких Ђ¬ита-1ї. ѕосле левосторонней торакотомии в четвертом межреберье слева рассекали перикард и обнажали сердце. ќриентиру€сь на медиальный край ушка левого предсерди€ слева и конус легочной артерии справа, определ€ли локализацию общего ствола левой коронарной артерии и отход€щую от нее в сторону верхушки сердца - нисход€щую ветвь левой коронарной артерии, под которую при помощи атравматической иглы подводили лигатуру. ѕосле этого свободные концы лигатуры проводили через окклюдер, который представл€л собой полую полипропиленовую трубку длиной 3 см и внутренним диаметром 2 мм. ѕутем смещени€ трубки к сосуду добивались окклюзии нисход€щей ветви левой коронарной артерии, а в противоположном направлении - реперфузии. — целью поддержани€ окклюзии в течение 10 мин на противоположный от сердца конец трубки накладывали эластичный фиксатор, в котором в нат€нутом состо€нии фиксировались свободные концы лигатуры. ѕо истечении 10-минутной окклюзии сосуда эластичный фиксатор снималс€, окклюдер удал€лс€, тем самым добива€сь реперфузии миокарда. ¬ эксперимент включали контрольную серию (группа є 1) с вышеописанной моделью окклю-зии-реперфузии миокарда и 2 серии с коррекцией изменений. ¬ группе є 2 за 30 мин до наложени€ окклюдера животным внутрибрюшинно вводилс€ 3-оксипиридина сукцинат в дозе 50 мг/кг, что составл€ет 10 % от LD50 [4]. ¬ группе є 3 за 30 мин до обратимой окклюзии сосуда внутрибрюшинно вводилс€ 3-оксипиридина адипинат в дозе 80 мг/кг, что составл€ет 10 %% от LD50 [2].
ѕо окончанию эксперимента проводили оценку размеров анатомической зоны риска и повреждени€ с помощью методики Ђдвойного окрашивани€ї синим Ёванса и трифенилтетразолием хлоридом (““—). ѕодсчет площадей зоны риска и зоны инфаркта проводили на оцифрованных снимках поперечных срезов сердец, на персональном компьютере, с помощью программы ImageJ 1.45s. ƒл€ гистологического исследовани€ кусочки миокарда фиксировали в 10 % растворе нейтрального формалина. —резы окрашивали гематоксилином и эозином. Ќа светооптическом уровне оценивали качественное состо€ние миокарда. —татистическа€ обработка материала осуществл€лась с помощью пакета статистических программ ЂExcelї на персональном компьютере, расчеты достоверности различи€ средних арифметических велись с помощью t-критери€ —тьюдента при 5 %% уровне значимости.
–езультаты исследовани€ и их обсуждение
ѕри микроскопическом исследовании миокарда в контрольной группе животных
в области экспериментального повреждени€ отмечались изменени€ дисциркул€-торного характера в виде неравномерного кровенаполнени€ сосудистых ветвей: полнокровие венозных сосудов и капилл€ров с их дистонией и периваскул€рным отеком, на фоне малокрови€ артериол. ћежмышечные и периваскул€рные пространства вы-раженно расширены за счет €влений отека. Ќаблюдались обширные участки кровоизли€ний и эритроцитарных экстравазатов. ѕоперечна€ исчерченность мышечных волокон нечетка€, с участками ее отсутстви€. Ќаблюдались €влени€ контрактурного повреждени€ кардиомиоцитов. ¬ просвете кровеносных сосудов и в ткан€х миокарда, прилегающих к сосудистой сети, наблюдалась начинающа€с€ лейкоцитарна€ инфильтраци€ преимущественно нейтрофильно-го характера. √истологические изменени€ в сердце у контрольных животных, вы€вленные нами, соответствуют данным литературных источников [1]. ¬се описанные изменени€ в морфологической картине миокарда при ишемии-реперфузии характеризуютс€ восстановлением кровообращени€ в зоне ишемии, что ведет к ограничению зоны повреждени€, а с другой стороны, к массивным кровоизли€ни€м в поврежденную ткань и воспалительной реакции.
ѕри верифицировании зоны риска супра-витальной окраской синим Ёванса у животных на фоне экспериментальной ишемии-реперфузии объем зоны ишемии составил 49,02 ± 3,25 % от общего объема сердца (рисунок, 1). ѕри последующем окрашивании ““—-негативные участки в пределах зоны риска не были обнаружены.
ѕри ишемии-реперфузии на фоне введени€ 3-оксипиридина сукцината микроскопическа€ картина миокарда в области экспериментального повреждени€ была схожа с предыдущей группой животных. —охран€лись изменени€ дисциркул€торно-го характера, про€вл€ющиес€ полнокровием венозных сосудов и капилл€ров с их дистонией и периваскул€рным отеком на фоне малокрови€ артериол. ѕоперечна€ ис-черченность мышечных волокон нечетка€. ѕрослеживались участки контрактурного повреждени€ кардиомиоцитов. »нтерсти-циальный отек зоны повреждени€ оставалс€ выраженным. —охран€лись обширные участки кровоизли€ний и эритроцитарных экстравазатов. ѕроцессов лейкоцитарных инфильтраций отмечено не было.
ѕри визуализации зоны риска суправи-тальной окраской синим Ёванса у животных при экспериментальной ишемии-реперфузии на фоне введени€ 3-оксипиридина сукцината объем зоны ишемии составил 33,96 ± 3,58 %
FUNDAMENTAL RESEARCH є 10, 2014
от общего объема сердца, что достоверно (рисунок, 2). ““—-негативные участки также меньше на 30,72 % (рк < 0,005) аналогичных не вы€вл€лись, что говорит об отсутствии показателей контрольной группы животных некроза в очаге ишемии.
1
2
«она ишемии миокарда при моделировании ишемии-реперфузии: ј - зона ишемии; Ѕ - неповрежденный миокард. ќкраска синим Ёванса; 1 - контроль; 2 - коррекци€
Ќа фоне введени€ 3-оксипиридина ади-пината морфологически, в области экспериментального повреждени€ миокарда, отмечалс€ выраженный интерстициальный отек ткани сердца, про€вл€ющийс€ расширением межмышечных и периваскул€рных пространств. ќтмечалось полнокровие венозных сосудов и капилл€ров с их дисто-нией и периваскул€рным отеком и малокровие артериол. ѕоперечна€ исчерченность мышечных волокон нечетка€. Ќаблюдались участки контрактурного повреждени€ кардиомиоцитов. —охран€лись обширные участки кровоизли€ний и эритроцитарных экстравазатов, выраженность которых приближаетс€ к аналогичной других групп исследуемых животных. ѕроцессов лейкоцитарных инфильтраций отмечено не было.
ѕри окрашивании зоны риска суправи-тальной окраской синим Ёванса у животных при экспериментальной ишемии-ре-перфузии на фоне введени€ 3-оксипиридина адипината объем зоны ишемии составил 38,32 ± 0,38 % от общего объема сердца, что достоверно меньше на 21,82 % (рк < 0,005) аналогичных показателей контрольной группы животных.
«аключение
“аким образом, как 3-оксипиридина адипинат в дозе 80 мг/кг, так и 3-оксипи-ридина сукцинат в дозе 50 мг/кг умень-
шают зону ишемии при моделировании окклюзии-реперфузии ветви левой коронарной артерии у крыс и уменьшают выраженность лейкоцитарной инфильтрации в очаге повреждени€ миокарда. ¬ наших исследовани€х вы€влена больша€ эффективность 3-оксипиридина сукцината в дозе 50 мг/кг при коррекции реперфузионного синдрома в эксперименте. “акой результат св€зан с особенност€ми структуры данного соединени€. “ак, при остром повреждении миокарда на первый план выходит антиги-поксантное и нейромедиаторное действие сукцината [8]. ¬ отличие от большинства окисл€ющихс€ в митохондри€х субстратов сукцинат поставл€ет свои восстановительные эквиваленты по более быстрому пути. ќкисление сукцината идет с большей скоростью, благодар€ чему мощность процесса ресинтеза ј“‘ выше, чем у других субстратов. ѕо€вление сукцината в кровотоке €вл€етс€ дл€ всех систем организма естественным сигналом дефицита кислорода. » этот сигнал запускает каскад адаптивных реакций как в районе собственно ишемического очага, так и на уровне нейроэндокринной системы целостного организма [9]. “ем самым сукцинат участвует в формировании срочных защитных механизмов от кислородной недостаточности [8]. ¬ св€зи с этим перспективным представл€етс€ использование производных 3-оксипиридина, в пер-
1106
¬ MEDICAL SCIENCES ¬
вую очередь сукцинатсодержащих, дл€ коррекции реперфузионного повреждени€ при реваскул€ризации миокарда.
—писок литературы
1. ¬ли€ние семакса на апоптотическую гибель кардиомиоцитов крыс при необратимой ишемии и ишемии-репер-фузии / ј.√. Ѕердалин, —. ј. √аврилова, ј.¬. √олубева и др. // –оссийский медико-биологический вестник. - 2011. -є 2. - —. 1-6.
2. ¬озможности коррекции гибридными антиоксидан-тами морфофункциональных изменений при токсическом поражении печени / Ќ.¬. „аиркина, ¬.». »нчина, ≈.¬. —еменова и др. // ћорфологические ведомости. - 2007. - “. 1. -є 1-2. - —. 232-236.
3. ƒиагностика и профилактика реперфузионного повреждени€ миокарда в услови€х экспериментального инфаркта миокарда / ƒ.¬. –уднев, ¬.¬. ѕичугин, ≈.ј.  онорев и др. //  ардиологи€. - 1988. - є 2. - —. 94-97.
4. «орькина ј.¬. ‘армакологическа€ коррекци€ пролонгированного иммобилизационного стресс-синдрома: ав-тореф. дис. ... д-ра мед. наук. -  упавна, 1997. - 42 с.
5. »сследование кардиопротекторных свойств 3-ок-сиприридина адипината при хронической сердечной недостаточности в эксперименте / ћ.Ќ. «амотаева, ¬.». »нчина, ».Ќ. „аиркин и др. // ‘ундаментальные исследовани€. -2013. - є 3. - —. 62-66.
6.  ардиопротекторна€ эффективность 3-оксипириди-на сукцината и 3-оксипиридина адипината при острой сердечной недостаточности в эксперименте / ћ.Ќ. «амотаева, ¬.». »нчина, ».Ќ. „аиркин и др. // —овременные проблемы науки и образовани€. - 2014. - є 2. [Ёлектронный ресурс]. URL: www.science-education.ru/116-12838.
7. Ћитвицкий ѕ.‘., —андриков ¬.ј., ƒемуров ≈.ј. јдаптивные и патогенные эффекты реперфузии и реоксиге-нации миокарда. - ћ.: ћедицина, 1994.
8. Ћукь€нова Ћ.ƒ. ѕерспективы энерготропной терапии митохондриальных дисфункций при патологи€х, включающих гипоксическую компоненту // ћедико-социальные аспекты здравоохранени€ и современной фармакологии. „асть 1. - ћ., 2008. - —. 84-105.
9. ћаевский ≈.». —укцинат аммони€ - Ђальтернативаї антиоксидантам? / ≈.». ћаевский, ћ.Ћ. ”читель, ≈.¬. √ришина // Ѕиофизика. - 2010. - є 11. - —. 78-92.
10. –оль препаратов магни€ в профилактике синдрома Ђреперфузииї у больных ќ»ћ. / ».—. —в€тов, ј.ћ. Ўилов, Ћ.ј. ћаксимова, и др. // “ќѕ-медицина. -1999. є 3. - —. 29-30.
11. Repefusion injury induces apoptosis in rabbit cardio-myocytes / R.A. Gottlieb, K.O. Burleson, R.A. Kloner et al. // J. Clin. Invest. - 1994. - Vol. 94. - P. 1621-1628.
References
1. Berdalin A.G., Gavrilova S.A., Golubeva A.V. et al. Ros-siyskiy medico-biologicheskiy vestnik,, 2011. no 2, pp. 1-6.
2. Chairkina N.V., Inchina V.I., Semenova E.V. et al. Morphological newsletter, 2007. Vol. 1, no 1-2, pp. 232-236.
3. Rudnev D.V., Pichugin V.V., Konorev E.A. et al. Kardi-ologija, 1988. no 2, pp. 94-97.
4. Zor'kina A.V. Farmakologicheskaja korrekcija prolongi-rovannogo immobilizacionnogo stress-sindroma. (Pharmacological correction of prolonged immobilization stress syndrome). Kupavna, 1997. 42 p.
5. Zamotaeva M.N., Inchina V.I., Chairkin I.N. et al. Fundamental research, 2013. no 3, pp. 62-66.
6. Zamotaeva M.N., Inchina V.I., Chairkin I.N. et al. Modern problems of science and education, 2014. no 2. available at: www.science-education.ru/116-12838.
7. Litvickij P.F., Sandrikov V.A., Demurov E.A. Adap-tivnye i patogennye jeffekty reperfuzii i reoksigenacii miokarda. (Adaptive and pathogenic effects of reperfusion and reoxygen-ation of the myocardium.) Moscow, Medicina, 1994.
8. Luk'janova L.D. Mediko-social'nye aspekty zdravoohraneni-ja i sovremennoj farmakologii. (Medical and social aspects of health and modern pharmacology). Moscow, 2008, pp. 84-105.
9. Maevskij E.I., Uchitel' M.L., Grishina E.V. Biofizika, 2010. no 11, pp. 78-92.
10. Svjatov I.S., Shilov A.M., Maksimova L.A. et al. TOP-medicina, 1999. no 3, pp. 29-30.
11. Gottlieb R.A., Burleson K.O., Kloner R.A. et al.. J.
Clin. Invest, 1994. Vol. 94, pp. 1621-1628.
–ецензенты:
Ѕлинов ƒ.—., д.м.н., профессор, заведующий кафедрой организации здравоохранени€, ‘√Ѕќ” ¬ѕќ Ђћордовский государственный университет им. Ќ.ѕ. ќгареваї, г. —аранск;
—ипров ј.¬., д.м.н., профессор кафедры фармакологии и клинической фармакологии с курсом фармацевтической технологии, ‘√Ѕќ” ¬ѕќ Ђћордовский государственный университет им. Ќ.ѕ. ќгареваї, г. —аранск.
–абота поступила в редакцию 02.12.2014.
¬ FUNDAMENTAL RESEARCH M 10, 2014 ¬

пїњ